高效液相色谱仪(HPLC)作为分析化学领域的核心设备,广泛应用于制药、食品、环境监测等行业。然而,在实际操作中,实验人员常面临分析时间长、分离效果差、重复性低等问题。本文结合资深工程师的实践经验,从样品前处理、仪器参数优化、系统维护与故障排查等维度,系统梳理提升HPLC操作效率的实操技巧。

一、样品前处理:从源头保障效率
样品前处理是HPLC分析的关键环节,其质量直接影响色谱柱寿命与分析结果准确性。资深工程师建议:
杂质去除:采用固相萃取(SPE)或液液萃取(LLE)技术,针对性去除蛋白质、脂类等干扰物。例如,检测食品中农药残留时,用乙腈提取后经Florisil固相萃取柱净化,可有效去除色素和脂类,避免色谱柱污染。
溶剂选择:样品溶剂需与流动相兼容。若样品溶剂强度高于流动相(如用纯甲醇溶解样品注入水相流动相),会导致峰展宽。建议将样品溶解在流动相或弱极性溶剂中,确保进样后溶剂与流动相快速混合。
进样量控制:根据色谱柱载样量合理设置进样体积。例如,对于5μm粒径的C18色谱柱,进样量建议控制在10-20μL;若样品浓度过高,需稀释至线性范围内,避免柱超载导致峰形畸变。

液相色谱仪在药物检测中的应用,这些环节缺一不可【行业百科】
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