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液相色谱仪基线问题该怎么处理,方法简单又实用[看完就懂]

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浏览:-发布日期:2021-09-22 17:59【

液相色谱仪基线问题该怎么处理?液相色谱仪在使用中难免会遇到各种问题,作为实验室中的实验人员,自然是需要掌握应对各种情况的知识的,今天来说一下液相色谱仪经常出现的基线问题,那么液相色谱仪基线问题该怎么处理?下面就给大家详细介绍一下。

液相色谱仪

故障描述:仪器运行后,检测器基线长时间漂移,不能平衡,有时候噪音很大。

故障原因及解决方法:首先,检查泵压是否稳定。若泵压不稳,单向阀内可能有异物或气泡;预柱、色谱柱、手动进样器、在线过滤片或者管路堵塞。

解决方法:将单向阀拆下用超声波清洗,根据样品分析时使用的不同流动相(如有机溶剂、无机溶剂、含盐溶剂),可以判断选择清洗液。清洗完单向阀并重新装上后,为防止在单向阀内产生气泡,可以先用甲醇做流动相赶一下气泡,再根据分析时使用的不同流动相选择不同的置换液(注意:在置换甲醇时不要把气泡带入管路中);更换色谱柱或者用阻尼管代替色谱柱,看压力有无变化,判断色谱柱是否堵塞。另外判断其他部分是否堵塞,可以通过用一段外接管路将其短路连接的方法,观察短接后泵压力的变化,判断手动进样器、预柱等是否堵塞(用缓冲盐做流动相时,因盐分会在管路中析出,在使用前和使用后都要用纯水清洗流路,绝对禁止将缓冲溶液留在流路中静置过夜或更长时间)。检查完成后,泵的原因即可排除。

其次,检查流动相内是否有杂质。在停泵或者使用空气池(将流通池内的镜片和池垫片拆下,流通池内充满干燥的空气)时观察基线变化,若基线稳定,则说明流动相中有杂质(或者是因为氘灯能量不稳定造成的,后面会讲到)。流动相溶剂应选择HPLC的溶剂或以此为标准的溶剂,流动相使用前用0.45μm滤膜过滤、脱气,清除微粒和灰尘。检查流动相和流路,排查原因后,去除流动相内的杂质。

第三,检查检测器的氘灯能量是否稳定;流通池内是否有气泡;流通池镜片是否脏;仪器所在的环境是否有强的空气流;室温变化是否过大;是否使用双波长模式。

解决方法:在停泵或者使用空气池的情况下观察氘灯能量是否稳定。若样品池与参比池能量不稳定,则必须更换氘灯;观察流通池内是否有气泡,可以使用异丙醇或甲醇(使用注射器注射,从流通池进口缓缓推入)清洗流通池内部,排除气泡。流通池的出口处连接的是一根0.3mm I.D.×2m的背压管(增加背压,防止气泡产生),检查背压管是否完好或者增加背压设备;拆除流通池然后清洗池透镜(流通池构造如图1所示),如果无法去除污渍,请安装新的池透镜(安装池透镜片时需注意,镜片下面一定要先放置池垫圈,否则会导致镜片被压碎);观察室内环境是否符合液相色谱的实验室环境要求,改变仪器的位置,或防止所在环境有过多的变化;双波长模式中的噪音振幅是单波长模式中的10倍以上。小量的波长更改会使流动相吸光度发生非常大的更改。吸光度变化越大,噪音也就越大。更改波长,使其每单位波长的变化对吸光度产生的变化最小。通过这三步检查,故障即可排除。

液相色谱仪

以上就是解决液相色谱仪基线问题的方法,我们在使用时如果遇到这类情况一定要按照解决方法一步一步解决,这样才能不影响实验的进程。如需继续了解液相色谱仪相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《液相色谱仪用不好怎么办,掌握这些知识点就能轻车熟路[行业热搜]》。

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